Estudio multicéntrico argentino de detección y seguimiento de clones de hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN) por citometría de flujo multiparamétrica (CFM) de alta resolución

  • N Halperin Hospital de Clínicas “José de San Martín” (C.A.B.A.)
  • A Altube Hospital de Clínicas “José de San Martín” (C.A.B.A.)
  • E Agriello Laboratorio de Especialidades Bioquímicas-Bahía Blanca
  • C Caride Hospital de Clínicas “José de San Martín” (C.A.B.A.)
  • A Galeano FUNDALEU (C.A.B.A.)
  • Z Galeazzi International Integral Clinical Trial-Rosario
  • J Pavón International Integral Clinical Trial-Rosario
  • J López International Integral Clinical Trial-Rosario
  • J Palazzi International Integral Clinical Trial-Rosario
  • P Iommi Laboratorio de Especialidades Bioquímicas-Bahía Blanca
  • C Malusardi FUNDALEU (C.A.B.A.)
  • D Carelli Hospital Dr. Guillermo Rawson (San Juan)
  • C Rodríguez Hospital Nacional de Clínicas de Córdoba (Córdoba)
  • E Ledesma Laboratorio de Salud Pública de San Miguel de Tucumán
  • C Rodríguez Laboratorio de Salud Pública de San Miguel de Tucumán
  • J Correa Laboratorio de Salud Pública de San Miguel de Tucumán
  • E Ramis Hospital Dr. Guillermo Rawson (San Juan)
  • R Guevara Hospital General de Agudos Dr. Carlos G. Durand (C.A.B.A.)
  • V Novoa Hospital General de Agudos Dr. Carlos G. Durand (C.A.B.A.)
Palabras clave: hemoglobinuria paroxística nocturna, gen PIGA, citometría de flujo

Resumen

La HPN es una enfermedad clonal adquirida, no maligna, que se origina por mutación del gen PIGA en una célula progenitora hematopoyética, lo que determina la ausencia total o parcial de múltiples proteínas que se unen a la membrana a través del ancla glicosilfosfatidilinositol (GPI). Nuevas estrategias de análisis y nuevas moléculas permiten una mayor sensibilidad en la detección de clones pequeños. Nuestro objetivo fue estudiar la incidencia de clones HPN por CFM en distintos centros del país y destacar la ventaja de protocolos estandarizados, con nuevas moléculas, en la detección de clones HPN al diagnóstico. Para ello se analizaron 832 muestras de sangre periférica (SP) pertenecientes a pacientes de 8 laboratorios de distintos puntos geográficos, del año 2013 al 2017, que habían sido evaluados para la identificación de clones HPN por citometría de flujo. Los clones HPN fueron identificados y cuantificados en la población de neutrófilos y monocitos según la expresión de moléculas ancladas por GPI como CD14, CD66b, CD24, CD157, CD16 y FLAER y en los glóbulos rojos (GR) según la expresión de CD59. Se evaluaron 832 muestras, en 189 (22,72%) se hallaron clones HPN. Los diagnósticos presuntivos fueron de: HPN en 279 muestras (33,53%), aplasia medular en 73 (8,77%), citopenias en 131 (15,75%), trombosis en lugares atípicos en 83 (9,98%), anemias en 170 (20,43%) y en 96 muestras no se especificó el diagnóstico (11,54%). Los clones más pequeños (≤10%) representaron el 8,65% de las muestras (72/832) y fueron hallados con mayor frecuencia en pacientes con sospecha diagnóstica de aplasia medular (36,11%), citopenias (25,00%), y HPN (22,22%). Los clones medianos (>10%-≤50%), detectados en 3,85% de las muestras (32/832), tuvieron principalmente sospecha de HPN. Los clones >50%, -10,22% de las muestras (85/832)- se encontraron fundamentalmente en HPN. Se observó un aumento en el número de pesquisas en pacientes con diferentes citopenias con respecto a años anteriores, con hallazgos de clones pequeños, gracias a los nuevos protocolos, que mostraron mayor sensibilidad y especificidad. En cuanto a la gestión del proceso de comunicación entre médico-bioquímico, se destaca una disminución en el porcentaje de pacientes que venían sin diagnóstico (41% al 2013, a 11,54% al 2017). Esto ayuda en la interpretación de los resultados y en el conocimiento de la enfermedad.

Referencias bibliográficas

1. Morado M, Subirá D, López M. Hemoglobinuria paroxística nocturna: nuevos tratamientos y recomendaciones generales para su diagnóstico. Med Clin. 2010; 134(8):369-374.
2. Brodsky R. How I treat paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Blood. 2009; 113: 6522-6527.
3. Urbano- Ispizua A, Gaya A, Colado E y col. Diagnóstico y tratamiento de la hemoglobinuria paroxística nocturna. Med Clin (Barc). 2011; 136 (3): 121- 127.
4. Devalet B, Mullier F, Chatelain B, Dogné JM, Chatelain C. Pathophysiology, diagnosis, and treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Eur. J. Haematol. 2015. http://www.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ejh.12543/epdf.
5. Hernández- Campo PM, Almeida J y Orfao A. Hemoglobinuria paroxística nocturna. Med Clin (Barc). 2008; 131(16): 617- 630.
6. Richards SJ, Rawstron AC, Hillmen P. Application of Flow Cytometry to the diagnosis of Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria. Cytometry. 2000; 42:223–233.
7. Guía Clínica HPN. Consenso Español para el diagnóstico y tratamiento de Hemoglobinuria Paroxística Nocturna. Actualización 2014.
8. http://www.sehh.es/images/stories/recursos/2014/documentos/guias/Guias_HPN_2014.pdf
9. Parker C, Omine M, Richards S. y col. Diagnosis and management of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Blood. 2005; 106(12): 3699- 3709.
10. Borowitz M, Craig F, DiGiuseppe J. y col. Guidelines for the diagnosis and monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and related disorders by flow cytometry. Cytometry Part B. 2010; 78B: 211- 230.
11. Roth A and Dühssen U. Treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria in the era of eculizumab. European Journal Haematology. 2011; 87: 473- 479.
12. Sutherland DR, Keeney M, Illingworth A. Practical guidelines for the high-sensitivity detection and monitoring of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria clones by flow cytometry. Cytometry Part B. 2012; 82B: 195-208.
13. Sutherland DR, Illingworth A, Keeney M, and Richards SJ. High-sensitivity detection of PNH red blood cells, red cell precursors, and white blood cells. Curr. Protoc. Cytom. 2015; 72:6.37.1-6.37.29.
14. Sutherland DR, Ortiz F, Quest G, Illingworth A, Benko M, Nayyar R, Marinov I. High-sensitivity 5-, 6-, and 7-color PNH WBC assays for both Canto II and Navios plataforms. Cytometry B Clin Cytom. 2018 Jan 30.
Publicado
2019-01-21
Sección
Artículos Originales